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  • 胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异有哪些

    2021-09-26 胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采取胎牛血获取的血清,因其未与外界环境接触,所以血清内IgG等免疫因子相对含量较少,适合用于免疫类细胞的培养。胎牛血清与新生牛血清在蛋白组成上的差异还是很明显的。首先,胎牛血清总蛋白含量(g/dl)约为2%-4%,新生牛血清约为3.0%-5.0%,成牛血清则高达8%-10%.从蛋白含量上也可以初步判断一个血清是否为胎牛或新生牛血清,蛋白含量越高说明牛龄越大,目前检测蛋白含量是初步检测一项重...
  • 常见的细胞转染技术可分为瞬时转染和稳定转染

    2021-08-29 细胞转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮...
  • 一文带你了解关于细胞增殖的知识

    2021-08-27 一、什么是细胞增殖细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞。二、细胞增殖的意义和方式意义:细胞增殖是生活细胞的重要生理功能之一,是生物体的重要生命特征。细胞的增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。方式:真核生物的分裂依据过程不同有三种方式,有有丝分裂,无丝分裂,减数分裂。其中有丝分裂是人、动物、植物、真菌等一切真核生物中的一种zui为普遍的分...
  • 预染蛋白Marker和未预染蛋白Marker有哪些不一样

    2021-07-27 在Western实验中,蛋白Marker可以监控蛋白质在SDS-PAGE中的迁移,监控蛋白的转膜效率,确定蛋白分子量大小。选择正确的蛋白Marker是westernblot实验成功的条件之一。蛋白Marker分为两种:一种是未预染的Marker,即宽分子量蛋白标准,高分子量蛋白标准及低分子量蛋白标准;另一种是预染的Marker,即单色预染和多色预染。一、未预染蛋白Marker未预染的蛋白Marker是简单,也是最准确的一种,由于没有附带染料分子或者标记大小正好是蛋白原本的大小...
  • 如何避免胎牛血清使用时出现黑点

    2021-06-27 在细胞培养过程中,经常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,最常使用的Gibco胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,我们在实验中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根据具体细胞选择合适的Gibco胎牛血清浓度。为防止客户由于操作方面而使黑点生成的办法。对此一定要做好以下几点。方可使细胞培养顺利。(1)尽可能地减少血清冻融次数。(...
  • 这样做能防止胎牛血清产生沉淀

    2021-05-30 沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。如何避免胎牛血清中产生沉淀?按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2)血清分装冻...
  • 带你了解细胞凋亡检测试剂盒的知识

    2021-04-19 细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。形态学检测是研究细胞凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的,起初,细胞间连接和微绒毛消失,细胞体积缩小,胞浆凝缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成一个个空泡,核糖体与线粒体等细胞器聚集,结构尚无明显改变,细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边,细胞核固缩呈均一的致密物,进而断裂成碎块,此时细胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不断出芽、脱落,一个细胞变成数个大小不等的有膜...
  • 液体培养基接种要注意的事项有哪些

    2021-02-24 液体培养基,固体培养基的对应词,是微生物或动植物细胞的液状培养基。它具有进行通气培养、振荡培养的优点。在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。由于在通气或在振荡的条件下,可消除这种阻碍以及增加供氧量,所以有利于细胞生长,提高生产量。液体培养基接种要注意的事项有哪些:①用酒精棉消毒操作台面。将移液器吸头盒放入酒精灯右侧,靠近酒精灯放置。将需要进行液体转接的试管插在试管架上,置于酒精灯左边左手附近。将移液器调至合适的刻度放于右手附近的架子上...
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